Препарирование плодовых тел. Микроскопирование и определение грибов

Для изучения гимениального слоя сделайте тоненький поперечный срез через пластинку, препаровальной иглой перенесите его на предметное стекло и поместите в каплю 5%-ной щелочи (КОН или NaOH), которая способствует набуханию высохших оболочек спор и клеток и просветляет препарат. Прикройте срез покровным стеклом и рассмотрите его сначала при малом (10х7), а потом при большом (10х40) увеличении микроскопа. Отметьте цвет спор, их форму, строение оболочки, наличие капель масла в протоплазме. С помощью окулярной линейки измерьте в микронах длину и ширину самых крупных и самых мелких спор и запишите размеры по формуле Д₁-Д₂хШ₁-Ш₂, где Д - длина, Ш - ширина споры. Если строение оболочки хорошо рассмотреть не удается, примените большее увеличение - 15х60, 15х90; используйте его с помощью иммерсионной жидкости (например, кедрового масла).

Рассмотрите базидии; отметьте форму базидий и количество спор на стеригмах. Разыщите цистиды; если они имеются - измерьте их длину и ширину, опишите также форму, цвет и расположение цистид на пластинках - только по краю или по всей плоскости, укажите количество их. Изучите характер трамы. Все микроструктуры тщательно зарисуйте.

Сделайте срезы через покровную ткань, мякоть шляпки и ножки; рассмотрите строение гиф, которыми они образованы. Отметьте структуру ткани - однородна она или нет, имеются ли в ней, кроме гиф, еще какие-нибудь элементы.

При изучении микроструктур можно применить некоторые красящие вещества, чтобы выделить те части грибной клетки, которые особенно важны для определения.

Для изучения оболочек спор сыроежковых пользуются обычно реактивом Мельцера: 1,5 г иодистого калия растворяют в 20 мл дистиллированной воды, добавляют 0,5 г иода и 20 г хлоралгидрата. Реактив окрашивает споры сыроежковых и некоторых других грибов в синий цвет (амилоидные споры).

Хлор-цинк-иодом окрашивают клетчатку в фиолетовый цвет. Для получения этого реактива 30 г хлористого цинка растворяют в 14 мл воды, прибавляют 5 г иодистого калия и 1 г кристаллического иода. Реактивом на гликоген служит раствор Люголя: 2 г иодистого калия растворяют в 300 мл дистиллированной воды, добавляют 1 г кристаллического иода. Реактив дает фиолетовую окраску.

Сульфованилином (1-2 кристаллика ванилина на 1 каплю концентрированной серной кислоты) окрашивают млечные ходы и цистиды грибов; кармином красят базидии.

Данные микроанализа, особенно сведения о спорах и цистидах, занесите в этикетку с описанием макропризнаков. Теперь, окончательно оформленная, она становится самым важным документом, на основании которого вы будете производить определение видовой принадлежности образца.

Установив с помощью определителей систематическое положение гриба, запишите его полное название по-русски и по-латыни на лицевую сторону этикетки.